Wirkmechanismus von Qishen Yiqi Droplets bei der Regulation der Darmflora und des ROS/TXNIP/NLRP3-Signalwegs zur Verbesserung der chronischen Herzinsuffizienz bei Ratten

LYU Lifei ,  

ZHU Tingting ,  

DING Fan ,  

LU Yingdong ,  

CUI Xiangning ,  

摘要

Ziel ist es, die regulierende Wirkung und den Mechanismus von Qishen Yiqi Droplets auf die Darmflora und den ROS/TXNIP/NLRP3-Signalweg bei chronischer Herzinsuffizienz (CHF) -Ratten zu untersuchen. Methoden 65 SPF-Männchen Sprague-Dawley-Ratten wurden mit einer Kombination aus subkutaner multipler Adrenalin-Verabreichung und Kontrolle der Nahrungsaufnahme befördert, um ein CHF-Modell zu etablieren. Die erfolgreich modellierten Ratten wurden nach dem Zufallsprinzip in die Modellgruppe, die Captopril-Gruppe (5,30 mg/kg) und die niedrig-, mittel- und hochdosierten Qishen Yiqi-Gruppen (0,08, 0,16, 0,32 g/kg) aufgeteilt, jeweils 11 Tiere pro Gruppe. Eine zusätzliche leere Gruppe umfasste 7 Tiere. Die Tiere der Medikamentengruppen erhielten entsprechende Dosierungen über eine Magensonde, während die leere Gruppe und die Modellgruppe eine gleichwertige Menge an destilliertem Wasser über die Sonde erhielten, für einen Zeitraum von 4 Wochen. Die Herzfunktion der Ratten wurde mittels transthorakalem Ultraschall gemessen, und die Serumkonzentrationen von BNP, LPS, Interleukin-18 (IL-18) und Interleukin-1β (IL-1β) wurden mittels ELISA untersucht. Die CK, LDH und CK-MB-Gehalte wurden mit einem automatisierten biochemischen Analysator gemessen. Die histopathologischen Veränderungen des Myokardgewebes wurden unter Verwendung einer Hämatoxylin-Eosin (HE) -Färbung beobachtet. Der ROS-Spiegel im Myokard wurde mit einem Durchflusszytometer gemessen. Die Expression von TXNIP und NLRP3 im Myokardgewebe wurde mit Immunhistochemie untersucht. Die mRNA- und Proteinexpression von TXNIP, NLRP3, Apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD (ASC), Caspase-1 und IL-1β im Myokard wurde mit Echtzeit-PCR und Westernblotting analysiert. Die Expression von Thioredoxin (Trx), Tight Junction Protein Zonula Occludens-1 (ZO-1), Occludin und Claudin-5 im Myokard wurde mit Westernblotting untersucht. Abschließend wurde mittels Hochdurchsatz-Sequenzierung von 16S rDNA Unterschiede in der Darmmikrobiota bei den Ratten der leeren, Modell- und hochdosierten Qishen Yiqi-Gruppen ermittelt. Verglichen mit der leeren Gruppe zeigten die Ratten der Modellgruppe eine signifikante Abnahme des linksventrikulären Ejektionsfraktion (LVEF) und der linksventrikulären Verkürzungsfraktion (LVFS) (P<0,01); die Serumspiegel von BNP, IL-18, IL-1β und LPS waren signifikant erhöht (P<0,01), ebenso wie die Gehalte an CK, LDH und CK-MB (P<0,01); im Myokardgewebe konnte eine Fibrose, Zellkörperlockerung, runde Vakuolenveränderung, lokale Faserlösungen und fibrose Infiltration festgestellt werden; der ROS-Spiegel im Myokard war signifikant erhöht (P<0,01); die Expression von TXNIP und NLRP3 im Myokardgewebe war signifikant erhöht (P<0,01); die mRNA- und Proteine Expression von TXNIP, NLRP3, ASC, Caspase-1 und IL-1β war signifikant erhöht (P<0,05, P<0,01), während die Expression von Trx, ZO-1, Occludin und Claudin-5 signifikant abnahm (P<0,01). Verglichen mit der Modellgruppe zeigte die hochdosierte Qishen Yiqi-Gruppe die signifikantsten Veränderungen, eine signifikante Zunahme von LVEF und LVFS (P<0,01); die Serumspiegel von BNP, IL-18, IL-1β und LPS waren signifikant verringert (P<0,01), ebenso wie die Gehalte an CK, LDH und CK-MB (P<0,01); die Myokardschäden verbesserten sich; der ROS-Spiegel im Myokard war signifikant verringert (P<0,01); die Expression von TXNIP und NLRP3 im Myokardgewebe war signifikant verringert (P<0,01); die mRNA- und Proteine Expression von TXNIP, NLRP3, ASC, Caspase-1 und IL-1β war signifikant verringert (P<0,05, P<0,01), während die Expression von Trx, ZO-1, Occludin und Claudin-5 signifikant zunahm (P<0,01). Die 16S rDNA-Sequenzierungsdaten bestätigten, dass sich die Darmflora der Ratten nach der Modellierung und medikamentösen Intervention veränderte, und auch die ɑ- und β-Diversität der Mikrobiota zeigte signifikante Unterschiede. Im Vergleich zur leeren Gruppe wies die Modellgruppe Unterschiede auf Artebene bei den Bakterienarten auf, wobei die Abundanz der Oscillospiraceae-Familie abnahm (P<0,05), während die Lactobacillaceae-Familie zunahm. Im Vergleich zur Modellgruppe zeigte die hochdosierte Qishen Yiqi-Gruppe Veränderungen auf Artebene, wobei die Oscillospiraceae-Familie zunahm (P<0,05) und die Abundanz der Lactobacillaceae-Familie abnahm; auf Artebene verringerte sich die Abundanz von Segatella copri und Treponema succinifaciens, während die Abundanz von Kineothr

关键词

Qishen Yiqi Droplets;Darmflora;Reaktion zwischen aktiven Sauerstoff/Rosinoxidase/NLRP3-Signalweg;Lipopolysaccharid;chronische Herzinsuffizienz;Entzündungsreaktion;Kineothrix alysoides;Ratten

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