Le but de la présente étude est d'explorer le mécanisme d'action du prim-O-glucosylcimifugine sur le métabolisme du cholestérol dans les chondrocytes arthritiques en régulant la voie NEAT1/miR-128-3p de l'ARN long non codant (ARNlnc). Au cours de l'expérience, nous avons divisé 60 souris C57BL/6 en quatre groupes au hasard : groupe témoin, groupe sham, groupe modèle et groupe prim-O-glucosylcimifugine. Les modèles de souris arthritiques ont été créés dans les groupes modèle et prim-O-glucosylcimifugine selon la méthode de Hulth. Les souris du groupe prim-O-glucosylcimifugine ont été gavées avec la substance à une dose de 30 mg/(kg·j), tandis que les autres groupes ont reçu une solution saline à la même dose, pendant 8 semaines. Nous avons examiné la structure des chondrocytes par coloration à l'hématine-éosine (HE). Nous avons étudié les changements des niveaux d'ARNm NEAT1 et de miR-128-3p dans les tissus de cartilage des souris de tous les groupes par PCR en temps réel. L'expression des protéines dans les tissus de cartilage des souris, y compris les protéines A1 du transporteur de la BCB, le récepteur X du foie β (LXRβ), la matrice métalloprotéase-3 (MMP-3) et la protéine B liée à la lymphome-2 dans les mitochondries (Bax), a été détectée par immunobuvage. En utilisant la méthode ELISA, nous avons étudié la teneur en TNF-α dans le liquide synovial des articulations et le niveau de cholestérol total. Dans l'expérience conçue pour les chondrocytes cultivés, nous avons utilisé les groupes suivants : groupe témoin, groupe IL-1β, groupe IL-1β+prim-O-glucosylcimifugine, groupe IL-1β+over-expression d'ARNlnc NEAT1 (oe-ARNlnc NEAT1), groupe IL-1β+oe-ARNlnc NEAT1+prim-O-glucosylcimifugine, groupe IL-1β+inhibiteur de miR-128-3p, groupe IL-1β+inhibiteur de miR-128-3p+prim-O-glucosylcimifugine. Des modèles d'arthrite chez les souris ont été induits par IL-1β pendant 24 h, suivis de 48 h d'intervention dans chaque groupe, où le prim-O-glucosylcimifugine (90 mg/L) et l'inhibiteur de miR-128-3p (50 nmol/L) ont été ajoutés, respectivement. L'expression de l'ARNlnc NEAT1 dans les chondrocytes a été détectée par hybridation in situ à fluorescence. Les interactions cibles entre l'ARNlnc NEAT1 et miR-128-3p ont été déterminées en utilisant des vecteurs d'expression d'ARN double à fluorescence. L'hyper-expression de l'ARNlnc NEAT1 dans les chondrocytes de souris a été transférée par des particules virales à longue durée d'action. L'influence de l'hyper-expression de l'ARNlnc NEAT1 sur les niveaux d'ARNm de miR-128-3p dans les chondrocytes a été examinée par PCR en temps réel. L'expression de protéines ABCA1, LXRβ, MMP-3 et Bax dans les chondrocytes a été confirmée par immunobuvage après l'hyper-expression de l'ARNlnc NEAT1 et l'inhibition de miR-128-3p. Les résultats de la coloration à l'hématine-éosine ont montré que le prim-O-glucosylcimifugine améliorait considérablement la structure du cartilage dans l'arthrite. Les résultats de la PCR en temps réel ont montré que les niveaux d'ARNm de l'ARNlnc NEAT1 dans les tissus de cartilage étaient plus faibles et que les niveaux d'ARNm de miR-128-3p étaient plus élevés dans le groupe prim-O-glucosylcimifugine comparé au groupe modèle. Les résultats de l'immunobuvage ont indiqué que les niveaux d'expression de l'ABCA1 et du LXRβ dans les tissus de cartilage des souris du groupe prim-O-glucosylcimifugine étaient plus élevés que dans le groupe modèle, tandis que les niveaux d'expression de la MMP-3 et du Bax étaient plus bas. Les résultats de l'ELISA ont montré que la teneur en TNF-α dans le liquide synovial des articulations était plus basse dans le groupe prim-O-glucosylcimifugine que dans le groupe modèle (P<0.05). Les niveaux de cholestérol total dans le liquide synovial des articulations étaient plus bas dans le groupe prim-O-glucosylcimifugine que dans le groupe modèle (P<0.05). L'hybridation in situ à fluorescence a montré que l'intensité de la fluorescence moyenne de l'ARNlnc NEAT1 dans le groupe IL-1β+prim-O-glucosylcimifugine était réduite (P<0.05). Les résultats du vecteur d'expression double à fluorescence ont montré que l'activité relative de la fluorescence était réduite dans le groupe de plasmides de type sauvage de l'ARNlnc NEAT1 combinée à miR-128-3p mimics par rapport au groupe de miR-NC (P<0.05). Les résultats de la PCR en temps réel ont montré que les niveaux d'expression d'ARNm de l'ARNlnc NEAT1 dans le groupe IL-1β+oe-ARNlnc NEAT1+prim-O-glucosylcimifugine étaient plus faibles et que les niveaux d'ARNm de miR-128-3p étaient plus élevés par rapport au groupe IL-1β+oe-ARNlnc NEAT1. Les résultats de l'immunobuvage ont montré que dans les groupes IL-1β+oe-ARNlnc NEAT1+prim-O-glucosylcimifugine et IL-1β+inhibiteur de miR-128-3p+prim-O-glucosylcimifugine, les niveaux d'expression de l'ABCA1 et du LXRβ étaient plus faibles, tandis que les niveaux d'expression de la MMP-3 et du Bax étaient plus élevés par rapport au groupe IL-1β+prim-O-glucosylcimifugine (P<0.05). Conclusions. Le prim-O-glucosylcimifugine peut améliorer le métabolisme du cholestérol dans les chondrocytes arthritiques en médiatisant l'ARNlnc NEAT1/miR-128-3p.

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