目的 脳の微小血管疾患（CSVD）モデルラットに対する填髄通絡方の作用とそのメカニズムを検討する。方法 SPF級雄性SDラット60匹を無作為数字表法により偽手術群（n=9）とモデル群（n=51）に分けた。モデル群には両側総頸動脈の永久結紮法でCSVDモデルを作製した。成功した36匹のラットを無作為数字表法でモデル群、填髄通絡方低用量群（14.4 g/kg）、填髄通絡方高用量群（28.8 g/kg）、ドネペジル塩酸塩群（0.45 mg/kg）に分け、各群9匹とした。各投与群は対応する薬物を経口投与し、偽手術群とモデル群は同体積の生理食塩水を投与した。1日1回、28日間連続投与した。モリス水迷路試験によりラットの学習および記憶能力を評価し、HE染色で海馬病理学的状態を観察した。二重ルシフェラーゼリポーター実験によりmicroRNA-143-3p（miR-143-3p）と神経調節タンパク質-1（NRG-1）の標的関係を検証した。免疫蛍光染色でラットの脳白質NeuNおよび海馬組織NRG-1の蛍光発現を観察し、免疫組織化学染色で海馬組織NRG-1陽性発現を検出した。TUNEL染色で海馬組織の神経細胞アポトーシスを観察した。ウエスタンブロット法で海馬組織のNRG-1、ホスファチジルイノシトール3キナーゼ（PI3K）、リン酸化PI3K（p-PI3K）、プロテインキナーゼB（Akt）、リン酸化Akt（p-Akt）、B細胞リンパ腫2関連死促進因子（Bad）蛋白発現を検出した。リアルタイム蛍光定量PCR法で海馬組織のmiR-143-3pおよびNRG-1 mRNA発現を測定した。結果 偽手術群と比較し、モデル群は回避潜時延長、プラットフォーム通過回数減少、目標四分円滞在時間短縮、海馬の神経細胞病理損傷が顕著であり、脳白質NeuNおよび海馬組織NRG-1の平均蛍光強度が低下し、海馬組織NRG-1平均光密度値が減少した。神経細胞アポトーシス率は増加し、NRG-1、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白発現は低下、Bad蛋白発現は増加した。miR-143-3p mRNA発現は増加し、NRG-1 mRNA発現は低下した（p<0.05）。モデル群と比較し、填髄通絡方の低・高用量群およびドネペジル塩酸塩群は回避潜時短縮、目標四分円滞在時間延長、海馬神経細胞病理改善、脳白質NeuNおよび海馬組織NRG-1の平均蛍光強度増加、海馬組織NRG-1平均光密度値の上昇、神経細胞アポトーシス率の低下、NRG-1、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白発現の上昇、Bad蛋白発現の低下、miR-143-3p mRNA発現の低下、NRG-1 mRNA発現の上昇（p<0.05）を示した。二重ルシフェラーゼリポーター実験はmiR-143-3pとNRG-1の標的関係を示した。結論 填髄通絡方はmiR-143-3p/NRG-1軸およびその下流のPI3K/Aktシグナル伝達経路を調節することで海馬神経細胞損傷を軽減し、細胞アポトーシスを抑制し、神経細胞喪失を減少させ、CSVDラットの認知障害を改善する可能性がある。

脳微小血管疾患;填髄通絡方;マイクロRNA-143-3p;神経調節タンパク質-1;ホスファチジルイノシトール3キナーゼ/プロテインキナーゼBシグナル経路;アポトーシス;ラット