목적 뇌 미세혈관 질환(CSVD) 모델 쥐에서 답수통락방(Tianmuitongluo)의 효과 및 기전을 탐구한다. 방법 무작위 숫자표법으로 SPF 등급 수컷 SD 쥐 60마리를 가짜 수술군(n=9)과 모델군(n=51)으로 나누었다. 모델군은 양측 총경동맥 영구 결찰법으로 CSVD 모델을 구축하였다. 모델 구축에 성공한 36마리는 무작위 숫자표법으로 모델군, 답수통락방 저용량군(14.4 g/kg), 답수통락방 고용량군(28.8 g/kg), 염산도네페질군(0.45 mg/kg)으로 나누었고 각 군에 9마리씩 배치하였다. 각 투여군은 각각의 약물을 위관으로 1일 1회 28일간 투여하였고, 가짜 수술군과 모델군은 동일 체적의 생리식염수를 투여하였다. 모리스 수중 미로 실험으로 쥐의 학습 및 기억 능력을 평가하였고, HE 염색으로 해마 병리 상태를 관찰하였다. 듀얼 루시퍼레이스 리포터 실험으로 마이크로RNA-143-3p(miR-143-3p)와 신경 조절 단백질-1(NRG-1)의 표적 관계를 검증하였다. 면역형광염색으로 쥐 뇌 백질의 NeuN 및 해마 조직의 NRG-1 형광 발현을 관찰하였고, 면역조직화학염색으로 해마 조직의 NRG-1 양성 발현을 확인하였다. TUNEL 염색으로 해마 조직의 신경세포 아폽토시스를 관찰하였다. 단백질 면역반응법으로 해마 조직 내 NRG-1, 인지질3 인산 키나아제(PI3K), 인산화 PI3K(p-PI3K), 단백질 키나아제 B(Akt), 인산화 Akt(p-Akt), B세포 림프종2 관련 사망 촉진인자(Bad) 단백질 발현을 측정하였다. 실시간 형광 정량 PCR법으로 해마 조직 내 miR-143-3p와 NRG-1 mRNA 발현을 검출하였다. 결과 가짜 수술군과 비교하여 모델군은 도피 잠복기가 연장되고, 플랫폼 횡단 횟수가 감소하며, 목표 사분면 머무는 시간이 단축되었고, 해마 병리 손상이 뚜렷하였다. 뇌 백질 NeuN 및 해마 조직 NRG-1 평균 형광강도가 감소하였고, 해마 조직 NRG-1 평균 광밀도 값이 감소하였다. 신경세포 아폽토시스률이 증가하였으며, NRG-1, PI3K, p-PI3K, Akt, p-Akt 단백질 발현이 감소하고 Bad 단백질 발현은 증가하였다. miR-143-3p mRNA 발현은 증가했으며, NRG-1 mRNA 발현은 감소하였다(p<0.05). 모델군과 비교하여 답수통락방 저·고용량군과 염산도네페질군은 도피 잠복기가 단축되고, 목표 사분면 머무는 시간이 연장되었으며, 해마 병리 상태가 뚜렷하게 개선되었다. 뇌 백질 NeuN 및 해마 조직 NRG-1 평균 형광강도가 증가하였고, 해마 조직 NRG-1 평균 광밀도 값이 상승하였다. 신경세포 아폽토시스률이 감소하였고, NRG-1, PI3K, p-PI3K, Akt, p-Akt 단백질 발현이 증가하며 Bad 단백질 발현은 감소하였다. miR-143-3p mRNA 발현은 감소하고, NRG-1 mRNA 발현은 증가하였다(p<0.05). 듀얼 루시퍼레이스 리포터 유전자 실험은 miR-143-3p와 NRG-1 간 표적 관계가 있음을 보여주었다. 결론 답수통락방은 miR-143-3p/NRG-1 축 및 하위 PI3K/Akt 신호경로를 조절하여 해마 신경세포 손상을 완화하고, 세포 아폽토시스를 억제하며, 신경세포 손실을 줄여 CSVD 쥐의 인지장애를 개선할 수 있다.

뇌 미세혈관 질환; Tianmuitongluo; 마이크로RNA-143-3p; 신경 조절 단백질-1; 인지질3 인산 키나아제/단백질 키나아제 B 신호경로; 세포 아폽토시스; 쥐