Mechanism of Qishen Yiqi Dropping Pills in regulating gut microbiota and ROS/TXNIP/NLRP3 signaling pathway to improve chronic heart failure in rats

LYU Lifei ,  

ZHU Tingting ,  

DING Fan ,  

LU Yingdong ,  

CUI Xiangning ,  

摘要

Цель данного исследования заключается в исследовании регулирующего действия Qishen Yiqi Droplet Pill на сердечную недостаточность у крыс с хронической сердечной недостаточностью (CHF) в связи с кишечной микробиотой и взаимодействием активного кислорода (ROS) / Thioredoxin-interacting protein (TXNIP) / Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor 3 (NLRP3) сигнальным путем. Методы Использовали 65 мужских крыс уровня SPF, применяли метод подкожной многократной инъекции изопреналина и голодание для подготовки модели ХСН, успешно моделированные крысы были случайно разделены на модельную группу, каптоприл (5,30 мг / кг) и группы низкой, средней и высокой дозы Qishen Yiqi с каждой из 11, а также пустая группа, состоящая из 7 крыс, группы лекарственных веществ по отдельности. пустая группа и модельная группа были нагружены эквивалентным количеством дистиллированной воды, непрерывно в течение 4 недель. Функции сердца были обнаружены методом трансторакального ультразвукового исследования. Уровни эндотоксина исследовались с использованием ELISA, чтобы измерить уровни в крови, бета-типа тироксина (BNP) и липополисахаридов (LPS) и цитокинов -18 (IL-18) и интерлейкина -1β (IL-1β), который содержит лабораторный биохимический анализатор, метаболически метаболизм и печень, содержание холестерина езда на велосипеде и тяжелая метаболизмическая трудность содержания везения Ткани сердца интерфейса и дублирования и размазывания, исследование, дополняющее пересекающуюся методику проверки уровня ROS клеточного уровня сердца; Методы: Western blotting и интегрированное сканирование. В последнем использовался RT-qPCR и Western blotting для определения экспрессии мРНК и белка для TXNIP, NLRP3, апоптоза связанных пятен ASC, каспазы-1 и IL-1β в клетках сердца, а также RT-qPCR и Western blotting для определения экспрессии белка и мРНК Ткани сердца, маркировочные белки Thoredoxin (Trx) и белки тугих соединений части кишечника (КОК) (occludin) и белки (ZO-1) и белок герметический белок 5 (claudin-5)); Наконец, используя технологию высокопроизводительной секвенирования 16S rDNA, были установлены различия в микробиоте кишечника крыс из пустой группы, модельной группы и группы высокой дозы Qishen Yiqi. Результаты по сравнению с пустой группой, уровень фракции выброса левого желудочка (LVEF) и левой короткой оси (LVFS) существенно снизился (P<0.01) в модельной группе; Уровни BNP, IL-18, IL-1β и LPS в сыворотке значительно увеличились (P<0,01), содержание CK, LDH и CK-MB значительно увеличилось (P<0,01), в сердце обнаружено отек волокон и воздействие волокон, чтобы обеспечить видение злокачественных изменений в росписи HE, а также видеть замены в камбиалной пролонгации. часть гипотензивного эпителия и заметна роль апокалиптического вещества в обучении; Уровни ROS в клетках сердца значительно увеличились (P<0.01); Выражение TXNIP и NLRP3 в ткани сердца значительно увеличилось (P<0.01); Экспрессия мРНК и белка TXNIP, NLRP3, ASC, каспазы-1 и IL-1β значительно увеличились (P<0,05, P<0,01), а белковое выражение Trx, ZO-1, occludin и claudin-5 значительно уменьшилось (P<0.01). По сравнению с модельной группой, изменения в группе с высокой дозой Qishen Yiqi были наиболее заметными, и их LVEF и LVFS значительно увеличились (P<0.01); Уровни BNP, IL-18, IL-1β и LPS в сыворотке значительно уменьшились (P<0.01), содержание КК, ЛДГ и КК-МБ значительно уменьшились (P<0,01); Ущербность в ткани сердца улучшилась; Уровни ROS в клетках сердца значительно уменьшились (P<0,01); Экспрессия TXNIP и NLRP3 в ткани сердца значительно уменьшилась (P<0,01); Экспрессия мРНК и белка TXNIP, NLRP3, ASC, каспазы-1 и IL-1β значительно уменьшилась (P<0,05, P<0,01), а белковое выражение Trx, ZO-1, occludin и claudin-5 значительно увеличилось (P<0.01). Результаты секвенирования 16S rDNA подтверждают: после модельной группы и медикаментозного вмешательства виды микроорганизмов в кишечнике крыс изменились, и альфа- и бета-разнообразие возросло существенно; По сравнению с пустой группой, различия видов на уровне семейства таковы, что уровень родин Осциллосписси (Oscillospiraceae) снизился (P<0,05), а уровень родин Lactobacillaceae увеличился, на уровне вида видите Segatella copri и Treponema succinifaciens) вырос, Kineothrix alysoides (P<0.05), Ruminococcus callidus и Prevotellamassilia timonensis снизились; По сравнению с модельной группой, на уровне семейства Kineothrix alysoides уменьшилось в группе с высокой дозой микада), а Lactobacillaceae - уменьшилось на уровне вида Segatella copri и Treponema succinifaciens, уровень Kineothrix alysoides возрос (P<0.05). Выводы Qishen Yiqi Droplet Pill может регулировать относительную плотность кишечной симбиотической бактерии Kineothrix alysoides, снизить уровень LPS в сыворотке, подавить сигнальный путь ROS / TXNIP / NLRP3, усовершенствовать иммунную реакцию, тем самым оказывая лечебное воздействие на ХСН.

关键词

Qishen Yiqi Dropping Pills;gut microbiota;reactive oxygen species/thioredoxin interacting protein/NOD-like receptor protein 3 signaling pathway;lipopolysaccharide;chronic heart failure;inflammatory response;Kineothrix alysoides

阅读全文