Estudio del mecanismo de la fórmula Yiqi Huoxue en la promoción de la angiogénesis en ratas con infarto de miocardio basado en secuenciación del transcriptoma y farmacología de redes

DU Tianhui ,  

XIE Weibin ,  

ZHANG Yunshu ,  

WANG Hui ,  

LI Xinyi ,  

LIANG Caiyu ,  

ZHENG Chenglong ,  

GUO Shuwen ,  

摘要

Objetivo: Investigar el mecanismo regulador de la fórmula Yiqi Huoxue sobre la angiogénesis en ratas con infarto de miocardio mediante secuenciación del transcriptoma y farmacología de redes. Métodos: Se prepararon 12 ratas macho SD con modelo de infarto de miocardio mediante ligadura de la rama descendente anterior de la arteria coronaria izquierda. Una vez exitoso el modelo, se dividieron aleatoriamente en grupo modelo y grupo de fórmula Yiqi Huoxue, 6 en cada grupo; además, 6 ratas en el grupo de cirugía simulada sólo con paso de hilo sin ligadura. Al segundo día postoperatorio, al grupo de fórmula Yiqi Huoxue se le administró por vía oral una decocción acuosa de la fórmula (8.2 g/kg); los otros dos grupos recibieron el mismo volumen de agua destilada, una vez al día durante 28 días. Se evaluó la función cardíaca mediante ecocardiografía, midiendo la fracción de eyección del ventrículo izquierdo (LVEF), la fracción de acortamiento del ventrículo izquierdo (LVFS), el volumen telesistólico (LVESV) y el volumen telediastólico (LVEDV); se observó y fotografió la apariencia del corazón; se realizaron tinciones con hematoxilina-eosina (HE) y Masson para observar la infiltración de células inflamatorias y la proliferación de fibras de colágeno en el borde del infarto; se evaluó la expresión fluorescente de CD31 mediante inmunofluorescencia en dicho borde. La secuenciación del transcriptoma identificó genes diferenciales entre los grupos cirugía simulada y modelo, seguido de análisis GO y KEGG; la farmacología de redes seleccionó los objetivos de la fórmula; se tomó la intersección para análisis GO y KEGG y así predecir objetivos y vías clave en la angiogénesis post-infarto. Resultados: El corazón del grupo cirugía simulada era rosado y liso, sin signos evidentes de necrosis; el del grupo modelo estaba pálido y arrugado, con infarto claro en la zona de ligadura y adyacente; en el grupo fórmula el tejido miocárdico también se blanqueó, la zona infartada se redujo y el corazón aumentó de tamaño. En comparación con el grupo cirugía simulada, el grupo modelo mostró disminuciones en LVEF y LVFS, y aumentos en LVESV y LVEDV (P<0.05); en comparación con el grupo modelo, el grupo fórmula mostró aumentos en LVEF y LVFS y disminuciones en LVESV y LVEDV (P<0.05). La tinción HE mostró cardiomiocitos ordenados y morfológicamente intactos en el grupo cirugía simulada; el grupo modelo mostró morfología y disposición irregular de las células, con abundante infiltración inflamatoria; la fórmula redujo esta infiltración. La tinción Masson mostró fibras de colágeno rojas ordenadas en el grupo cirugía simulada; el grupo modelo mostró bordes celulares poco definidos con proliferación abundante de fibras de colágeno azules; la fórmula redujo estas fibras azules y mejoró el orden celular. La intensidad fluorescente de CD31 aumentó en el grupo modelo respecto al cirugía simulada (P<0.05) y aún más en el grupo fórmula (P<0.05). La secuenciación del transcriptoma identificó 691 genes diferenciales entre los grupos modelo y cirugía simulada; el análisis GO incluyó procesos celulares relacionados con la matriz extracelular (ECM), espacio extracelular; KEGG destacó enriquecimiento en interacción ECM-receptor y vía TGF-β. La farmacología de redes identificó 47 componentes principales y 756 objetivos de la fórmula. La intersección con genes diferenciales mostró 31 objetivos de angiogénesis post-tratamiento. GO y KEGG sugieren regulación a través del transporte de calcio y la vía VEGF. Conclusión: La fórmula Yiqi Huoxue podría promover la angiogénesis tras infarto de miocardio mediante transporte de calcio y vía VEGF, mejorando la estructura y función cardíacas.

关键词

infarto de miocardio;angiogénesis;fórmula Yiqi Huoxue;secuenciación del transcriptoma;farmacología de redes;ratas

阅读全文